Виды анализов и их расшифровка

Иммуноферментный анализ (ИФА) – этот вид анализов один из первых назначается после того, как общий и биохимический анализ крови укажут на возможное заражение вирусом гепатита С. ИФА показывает количество в крови антител Anti- HCV (вида IgM и вида IgG). Положительный результат — подтверждает возможность заражения, однако в 45% случаев положительный ИФА бывает у абсолютно здоровых людей (это так называемый, ложноположительный результат, обусловленный, например, проведенной вакцинацией организма).

Метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA) – проводится при положительном результате анализа ИФА, с целью подтверждения заражение гепатитом С. Положительный результат данного исследования также не является 100%-м свидетельством заражения.

Анализ полимеразной реакции (ПЦР), можно также встретить название РНК-анализ – проводится при положительном результате ИФА и рекомбинантного иммуноблотинга. Этот анализ считается более точным и показывает наличие гепатита С уже через 3-4 дня после попадания вируса в кровь (все остальные анализы – не ранее, чем через 7 дней после заражения). При положительном результате, можно говорить об активном вирусе гепатита С в крови обследуемого.

Таблица:

Существует несколько видов ПЦР анализа:

• Количественный — показывает количество бактерий вируса гепатита С. Считается, что концентрация бактерий вируса, превышающая 800 МЕ/мл, говорит об острой форме гепатита С. Концентрация бактерий вируса, не превышающая 800 МЕ/мл, говорит о начальной стадии заражения. Кроме того, при высокой концентрации вируса в крови обследуемого значительно увеличивается риск распространения заражения и осложняется лечение болезни.
• Качественный (генотипорованный) – показывает генотип вируса, позволяет более точно определить, какие именно препараты необходимо применять пациенту для лечения.

Помните, что расшифровку любых анализов должен проводить специалист – лишь в этом случае возможно назначение правильного лечения. Считается, что норма – это полное отсутствие в крови вируса РНК – тогда можно констатировать, что заражение гепатитом С не произошло. Но даже если РНК вирус обнаружен — это может происходить по разным причинам, в том числе, после завершения лечения и выздоровления пациента, после вакцинации и т.д.

Существует риск ложноположительного результата анализов, поэтому, в большинстве случаев, все виды обследований на гепатит С проводятся по 2 и более раз. Например, на начальной стадии попадания вируса в кровь, когда организм еще не успел выработать защитные антитела, анализы часто показывают положительный результат. Анализ полимеразной реакции тоже может быть ложноположительным при нарушении правил его проведения.

В связи с этим, положительные результаты анализов на гепатит С являются только основанием для проведения дальнейших более точных обследований, таких как: биопсия клеток печени, ультразвуковое обследование печени и желчного пузыря, компьютерная томография и др.

Симптомы развития гепатита С — выражены слабо, особенно на начальной стадии, поэтому необходимо четко соблюдать все профилактические меры. Необходимо регулярно проходить обследования – только так можно избежать развития вируса до острой и хронической форм.

Инфицирование

Инфекция острого гепатита C передается путем попадания зараженной крови в кровоток здорового человека. Такой путь передачи называется парентеральным. В зоне высокого риска заражения находятся люди, которые могут контактировать с потенциально инфицированной кровью. Это сотрудники медицинских лабораторий, пациенты, требующие переливание крови, трансплантацию органов, а также находящиеся на диализе.

В салонах красоты (предоставляющих услуги пирсинга, тату, маникюра и т.д.), а также стоматологических кабинетах все манипуляции должны происходить в санитарных условиях с использованием стерильных инструментов, так как HCV может попасть в организм через загрязненные инструменты.

Отдельно следует выделить наркозависимых людей. Многократное использование одного шприца с иглой разными лицами в разы повышает риск инфицирования. Именно наркоманы составляют большую часть больных гепатитом C и являются переносчиками вируса HCV.

В бытовых условиях инфекция может распространяться через личные средства гигиены: зубные щетки, бритвенные принадлежности.

Все способы передачи инфекции, кроме контакта с кровью, называются общим словом непарентеральный путь заражения. Таким способом гепатит C передается крайне редко, что связано с малой концентрацией вируса. Половой путь передачи составляет не более 10% случаев заражения. Передача вируса с молоком кормящей матери относится к единичным случаям.

Всем, кто находится в группе повышенного риска заражения, а также тем, кто имел неосторожность контактировать с инфицированной кровью, рекомендуется сдать анализы крови на выявление HCV.

Показания для проведения диагностики

Качественное исследование клеток РНК вируса гепатита С не проводится по желанию больного, показаниями для такой процедуры могут послужить лишь:

• Изучение тканей, выращенных с применением биопсии;
• Исследование лейкозов и опухолей злокачественного характера;
• Диагностика организма на наличие в нем генетических патологий;
• Идентификация особы путем сравнения биологических жидкостей пациента с имеющимися биоматериалами;
• Обнаружение возбудителя вирусной инфекции (при смешанном гепатите).

Кроме этого, анализ РНК способен показать оценку результативности текущего курса терапии, что очень важно при лечении вирусного заболевания.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

• отрицательный;
• положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен. Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% – это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

• правил хранения реактивов;
• соответствующей квалификации медперсонала;
• чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

• уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
• определяется эффективность противовирусного лечения;
• выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Подготовка и расшифровка

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

• сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
• непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
• за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
• минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

• положительный или отрицательный результат качественного анализа;
• количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта. 

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

Цели и задачи количественного исследования

Иногда количественный метод полностью отождествляют с определением вирусной нагрузки. Однако с помощью полимеразной цепной реакции решается не только необходимость подсчета содержания ПНК возбудителя в крови инфицированного человека. Диагностика на достоверном уровне – основная цель проводимого исследования. Но спектр полученной информации не ограничивается цифрами.

Для этого можно использовать и метод разветвленной ДНК, правда, с меньшей степенью достоверности, и тест на иммуноглобулины, недостаток которого заключается в необходимости тратить время на ожидание иммунного ответа организма.

А это в любом случае означает, что упускается драгоценное время для лечения. Задачи проведения количественного метода более многочисленны:

• диагностика заражения гепатитом еще в той стадии, когда остальные методы не могут этого сделать;
• определение самоизлечения (в иных случаях присутствие выработанных антител может ввести в заблуждение и дать уверенность в присутствии активного вируса);
• уровень нагрузки дает развернутое представление о степени геномной агрессивности;
• наглядная демонстрация степени успешности проводимой терапии;
• выявление компонентов, которые свидетельствуют о степени деструкции пораженного органа.

Стандартно выявляемый уровень вирусной нагрузки при диагностике ПЦР 50 МЕ (международных условных единиц, соответствующих наличию 125 копий в одном мг крови). Если сравнивать с транскрипционной амплификацией, это может показаться довольно низкой чувствительностью, потому что ТМА видит 10 МЕ или 25 копий в одном миллиграмме. Однако если обратиться к более дешевому методу разветвленной ДНК, то его способность видения всего-навсего 1250 копий или 500 МЕ, ровно в 10 раз ниже.

При этом последний не решает ни одной из задач, ради которых и используется более дорогой метод ПЦР. В определении подходящего метода и его расшифровке стоит ориентироваться не на стоимость теста, а на его эффективность. Это дает возможность обнаружить возбудитель на самом раннем этапе инфицирования, пока его количество в крови составляет ничтожную концентрацию.

Многое зависит от ресурсов, которыми располагает лаборатория или медицинский центр. Ведь амплификатор (прибор для проведения ПЦР) может быть разных модификаций, как и набор комплементарных праймеров, ДНК и полимераз. В вирусологии часто декларируется принцип, что возбудитель может не обнаружиться не потому что его нет, а потому что нет достаточных ресурсов для его идентификации.

Виды анализов при гепатите С

Болезнь страшна тем, что с ней можно жить долгие годы и не догадываться об этом. Чаще всего у больных отмечают: слабость, снижение аппетита, астению. Иногда отмечается рвота. Для комплексной расширенной диагностики требуется комплекс исследований, которые подтвердят заражение. Алгоритм анализов включает следующие процедуры:

• ОАК, ОАМ;
• коагулограмма;
• биохимия крови;
• печеночные тесты;
• ПЦР;
• ИФА.

Экспресс-тесты — быстрая диагностика на дому

Самостоятельно провести исследование можно с помощью тест-полосок.

Современный метод для определения маркера вируса — специальные полоски, которые подтвердят факт инфицирования. При обнаружении патогена они меняют цвет в течение 15 мин. Тесты пропитаны химическим препаратом и подтверждают инфекцию. Положительный результат — это наличие полосок в 2-х зонах: С и Т. Если одна из них появилась лишь в месте С, тест расценивают, как отрицательный. Потребуется повторный анализ при полном отсутствии изменений или наличии штриха в Т-зоне. Преимущества метода: 99% достоверности, удобство и простота.

Общий анализ мочи

При исследовании обращают внимание на появление билирубина, низкомолекулярных плазменных протеинов, примесей крови. Анализ мочи при гепатите содержит все эти элементы

Чем выше активность поражения, тем сильнее выражена билирубинурия и протеинурия. Желчный пигмент — первый указатель повреждения гепатоцитов появляется в результате распада гемоглобина.

Общий анализ крови

Развернутый ОАК — один из первых, который назначают при инфекции. Он готовится за несколько часов. Общий анализ крови при гепатите содержит неспецифические и косвенные признаки:

• Лейкопения в сочетании с лимфоцитопенией. Сниженный процент защитных телец происходит из-за борьбы и массовой гибели.
• Повышенное СОЭ, как основной воспалительный показатель.
• Низкий уровень тромбоцитов. Показывает на то, что печень не справляется с синтезом свертывающих факторов.

Биохимия для оценки работы печени

С помощью биохимического исследования можно получить представление о степени поражения органа вирусом.

Состав крови меняется при патологии печеночной ткани. Подтверждающий биохимический анализ проводят всегда. Печеночные пробы косвенно указывают на гепатит, дают представление о степени поражения и функциональной активности. О выраженном повреждении тканей органа говорят повышенные значения АСТ, ЛДГ-4, ЛДГ-5, ГГТ, ГЛДГ. АЛТ, ФМФА и СДГ. Это сокращенные названия ферментов. Показатели остроты процесса резко возрастают при бурном течении и внезапных рецидивах.

ИФА, о чем говорят результаты

Выявить серологические маркеры позволяет проведение анализа на антитела. Это самый первый тест, который покажет, был ли контакт с патогеном. Его чувствительность 90%. Кровь на гепатит этим способом не всегда подтверждает активность патологии и указывает на присутствие патогена. Анти НСV покажут присутствие позитивных образцов в течение 50-ти и более лет, если инфекция существовала. Для исследования нужно сдать венозную кровь.

ПЦР — надежный способ выявить инфекцию

Полимеразно-цепная реакция — диагностика, которой подвластна генетическая информация вируса и установка его генотипа. У инфицированного выявляют 1 из 6 субтипов. Каждый обозначается цифрой и буквой: 1, 2, 3; а или б. В зависимости от вида, болезнь может развиваться в стеатоз, карциному или цирроз. Метод, подтверждающий присутствие вируса, делает это качественно и количественно. Лаборант одновременно устанавливает 2 факта: наличие вируса и скорость его репликации. Расшифровка анализа имеет следующий вид. Отрицательный результат — вируса нет, если пишется положительный, то это подтверждает болезнь. Вирусная нагрузка делается по типу количественной цепной реакции. Чем она выше, тем интенсивнее размножение. Чем ниже, тем эффективнее терапия.

Ультрачувствительный тест

Такое исследование оправдано, если болезнь протекает в скрытой форме.

Так называется ПЦР в режиме реального времени. Скрининговый анализ крови на гепатит С проводят с гибридизационной детекцией. С его помощью определяют РНК вируса. Если результаты положительны несколько раз за 6 месяцев, они указывают на гепатит С. Высокоточный метод обнаружения назначают больным с повышенным уровнем антител к патогену, но с РНК под вопросом. При субклинической форме — это лучший вариант диагностики. Аналитическая чувствительность методики равняется 10 МЕ/мл и соответствует стандартам. Ее используют, чтобы показать наличие вируса при скрытых формах.

Расшифровка количественного исследования

Анализ сдается натощак, специальной подготовки не требуется. Если произошло предполагаемое инфицирование, не стоит проводить тест ранее, чем через 2 недели после контакта.

На выполнение анализа необходимо время, определяющееся уровнем оборудования (несколько часов или дней). После его окончания пациенту выдается бланк с расшифровкой результатов совместно с референтными значениями (нормативами). Следует сравнить свои показатели с предложенной документацией лаборатории, но почти во всех случаях данные анализа оцениваются следующим образом.

Таблица. Расшифровка количественного анализа на гепатит С.

Иммунологическая диагностика

Помимо всего прочего, можно определить антитела к гепатиту С. Расшифровка анализа сводится к указанию антител не только ко всем типам изучаемого заболевания, но и к печеночным антигенам.

Такой вариант диагностики может проводиться как в виде обычного исследования, так и посредством экспресс-теста. Для последнего используют как кровь, так и слюну. При окрашивании полоски в определенный цвет (согласно инструкции), можно говорить о наличии антител к гепатиту C у человека. Преимуществом экспресс-тестов является то, что их разрешается выполнять на дому.

Обычно расшифровка исследования сводится к указанию наличия/отсутствия антител к изучаемому заболеванию. Если пришел положительный результат, в организме они имеются. В противном случае говорить о наличии антител к гепатиту и печеночным клеткам нельзя.

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

• Тошнота и рвота;
• Болевые ощущения в области печени;
• Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
• Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
• Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
• Апатичное или депрессивное состояние.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

• Лицам, ухаживающим за инфицированными;
• Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
• Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
• Инъекционным наркоманам;
• Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
• Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Особенности количественного анализа

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

• вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
• эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
• риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
• риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

Показания

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

• положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
• положительный результат качественной ПЦР;
• контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Нам каких этапах заболевания проводится

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

• до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
• 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
• последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
• 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.