Анализ на вирусную нагрузку при гепатите с

Методика определения вирусной нагрузки

Для проведения анализа необходимо взять венозную кровь, в которой при помощи разнообразных лабораторных процедур вычисляется наличие или отсутствие РНК вируса в крови.

Есть взаимосвязь количественного показателя со стадией заболевания. Чем выше содержание РНК вируса, тем более запущенным считается заболевание.

Выделяют две разновидности анализа на вирусную нагрузку:

• качественный, при котором определяется присутствие или отсутствие вируса в крови;
• количественный, когда в расчет берется именно число клеток вируса в крови.

Для проведения вычислений используется следующее:

• Высокоточная полимеразная цепная реакция, которая позволяет выявить болезнь даже на самых ранних стадиях развития.
• Метод раздвоенной ДНК считается более доступным в смысле стоимости, но куда менее точным. Такой анализ может показать отсутствие вируса при его наличии.
• Транскрипционная амплификация позволяет выявить вирус на ранних стадиях. Главным достоинством методики считается ее относительная доступность.

Обычно врачи в государственных медицинских учреждениях используют первые две методики, поскольку стоит их проведение гораздо дешевле.

Однако вне зависимости от выбранного способа для установления степени вирусной нагрузки нужна немалая точность. Именно поэтому проведение анализа можно доверять лишь хорошему врачу-диагносту.

Какие анализы определяют

Многие пациенты задают вопрос, как узнать вирусную нагрузку и посчитать точное количество копий HCV. Это возможно только при постановке ПЦР. Данная методика позволяет выявить РНК гепатита С в организме человека, точно оценить его концентрацию. Также ПЦР позволяет врачу установить генотип вируса, что также является одним из основных критериев подбора методики лечения.

Анализ на вирусную нагрузку при гепатите С проводится в клинической лаборатории с использованием определенных тест-систем. Современные наборы отличаются не только специфичностью, но и высокой чувствительностью. Поэтому перед сдачей анализа (особенно при подозрении на раннее инфицирование либо при контроле эффективности лечения) необходимо поинтересоваться, какое оборудование применяют для оценки результатов.

Характеристика чувствительности диагностических методов

Перечень тест-систем с их характеристиками приведен в схеме:

Как определить вирусную нагрузку при гепатите С? Для этого пациенту необходимо обратиться в государственную или частную лабораторию и сдать кровь на количественную ПЦР. Нередко анализ выполняют в комплексе с генотипированием (целесообразно проводить при первичной диагностике).

Существует несколько методик проведения ПЦР, каждая из которых имеет свои преимущества и недостатки.

Их перечень приведен в таблице:

Название способа ПЦР	Описание реакции
Обратная транскрипция (ОТ)	одна из первых методик ПЦР, применяется с 1990 года; наработка копий ДНК осуществляется при помощи ДНК-зависимой ДНК-полимеразы, полученной из определенного вида бактерий; чувствительность метода невысока (от 100 МЕ/мл, но этот параметр можно повысить при помощи модификации ОТ ПЦР – «гнездового» (nested) способа постановки реакции
Лигазная ПЦР	Методика отличается высокой чувствительностью. По такому принципу «работает» тест-система Abbott Real Time
Транскрипционно-опосредованная амплификация

Подобный способ количественного определения копий вируса используется в наборах Versant HCV RNA Qualitative Assay от Bayer Diagnostics. Характеризуется:

• очень высокой чувствительностью – 50 копий/мл;
• скоростью выполнения (для получения первых результатов требуется 30–40 минут)

Метод гибридизации с использованием разветвленных зондов По такому принципу функционирует диагностическая система Versant HCV RNA 3.0, Bayer Diagnostics. Проводится в 96-луночных планшетах. Методика практически не применяется из-за низкой чувствительности (определяется от 2500 копий/мл). Однако в некоторых случаях исследование проводят для обнаружения вируса непосредственно в клетках печени

Обычно доктора знают все характеристики применяемых в лабораториях тест-систем. Чувствительность используемых диагностических наборов важна не только для количественного, но и для качественного определения РНК HCV. Выявление даже незначительной концентрации гепатита С позволяет провести диагностику в кратчайшие сроки после инфицирования. Впоследствии высокочувствительные количественные тест-системы способствуют более эффективному контролю проводимого лечения.

Может ли быть ошибка в таблицах?

Минимальная погрешность допустима, если анализ проводился в двух разных лабораториях, но нередко встречаются случаи с ложными результатами либо их отсутствием. Ошибки происходят при халатном отношении к биоматериалам, это неправильное хранение, загрязнение белковыми соединениями либо несоблюдение условий хранения. Чтобы добиться желаемого результата, доктор периодически отправляет пациента на исследования, если результат снизится, это говорит, что лечение дает положительный вирологический ответ. Очень важно, чтобы результаты с пояснительными таблицами соответствовали действительности.

Куда обратиться, чтобы сдать анализы?

Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.

В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения.

Поэтому  результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.

Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов.

Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.

Какой анализ нужно сдать для определения вирусной нагрузки при гепатите C

При положительном качественном тесте на наличие ВГС в крови (проще говоря, при обнаружении в крови РНК вируса) возникает необходимость в уточнении количественного показателя этого параметра, то есть, должна быть определена вирусная нагрузка.

Гепатит C «отмечается» в крови высокой или низкой концентрацией генома вируса, в зависимости от чего и ВН имеет соответствующее название. Сегодня для определения ВН пользуются тремя видами лабораторных анализов.

1. Метод ПЦР (расшифровка — «полимеразная цепная реакция») является наиболее чувствительным именно к ВГС, поэтому применяется чаще других методик для определения ВН.
2. Еще один достаточно простой и недорогой метод — исследование разветвленной ДНК (расшифровка — «дезоксирибонуклеиновая кислота»), но его недостатком считается слабая чувствительность к низким концентрациям ВГС.
3. Для тестирования ВН часто используют транскрипционную амплификацию, способную обнаружить в пробах крови следы нуклеиновых кислот.

Для исследования забирается венозная кровь, поэтому для подготовки к анализу достаточно ничего не есть с утра и не курить хотя бы за полчаса до сдачи анализа.

Сдача анализов в процессе лечения

При обнаружении ВГС проводится несколько тестов количественного анализа, требующих расшифровки:

• первоначальный, для назначения лечебных мероприятий;
• повторный — через месяц после начала терапии;
• через 3 месяца от начала терапии;
• через 6 месяцев.

Такие наблюдения дают возможность прогнозировать активность ВГС, предполагаемую скорость размножения вируса и вероятность ремиссий.

Расшифровка результатов результатов количественного анализа на вирус гепатита с и b

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена.

«Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Коэффициенты перевода разные (колеблются примерно от 1 до 5) и зависит от метода, использованного для определения количественного показателя.

В основном на практике принято, что 1 МЕ/мл = 4 копиям на мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему.

При гепатите C нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки(виремии):

Цифровое обозначение числа вируса	Описание итога
Не обнаружено	Норма для здорового человека. Вирус не найден или исход ниже грани чувствительности методики.
До 1.8*10^2 МЕ/мл (7,5*102 копий/мл)	Обнаружено в концентрации ниже линий границы.
До 8*10^5 МЕ/мл (2*106копий/мл)	Обнаружен вирус при хорошем прогнозе болезни и эффективном лечении. Низкая вирусная нагрузка.
Больше 8*10^5 МЕ/мл (2*106 копий/мл)	Обнаружено вирус и большая вирусная нагрузка.
Больше 2,4*10^7 МЕ/мл (1*108 копий/мл)	Обнаружен вирус в концентрации выше линейного диапазона.

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл.

1. Если при повторном анализа нагрузка вируса является меньшей, чем 8*105 МЕ/мл, то можно утверждать, что терапия идёт в правильном направлении и в борьбе с заболеванием есть успех.
2. Говорить о раннем вирусологическом ответе можно при условии снижения количественного присутствия РНК вируса на третий день лечения. Но вероятность этого находится на уровне 85%.
3. Если же, показатель более 8*105 МЕ/мл, то доктор должен пересмотреть схему лечения и выбрать более подходящую. Соответственно, чем больше уровень, тем сильнее вирус поразил организм и хуже прогноз.

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

• < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
• от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
• 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
• 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.

Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:

1. Хронический гепатит б диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
2. Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
3. Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
4. Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
5. Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

• ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
• ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
• ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса.

Возможны ли ошибки в анализе

Зачастую в выданных лабораторией результатах происходят значительные разбеги значений. В таких случаях не исключена вероятность ошибки. Чаще всего она может быть связана с:

• ошибкой лаборанта, проводившего анализ,
• неправильным хранением крови после забора,
• загрязнением крови белковыми или химическими элементами, лекарствами, гепарином,
• просроченными реагентами.

Поэтому рекомендовано делать обследование несколько раз, и лучше всего в одной лаборатории, чтобы отслеживать правильную динамику вирусной нагрузки.

Также для уверенности в достоверности результатов нужно придерживаться следующих правил:

1. Анализ нужно сдавать утром натощак (перерыв в приеме пищи должен быть минимум 8 часов).
2. Не допускается употребление никакой жидкости перед исследованием, кроме воды. О кофе, соке, чае, молоке нужно забыть.
3. Как минимум за 24 часа до анализа нельзя употреблять напитки, содержащие алкоголь, а также жареную и чересчур жирную еду.
4. Как минимум за 60 минут до исследования нельзя употреблять никотин.
5. Нужно отложить любые массажи, УЗИ, рентген, физиопроцедуры, физическую работу, спортивные тренировки, эмоциональные нагрузки.
6. Минимум за сутки нужно отказаться от приема любых лекарств.
7. Очень важно за 10-15 минут до анализа просто спокойно расслабленно посидеть.

Практика показывает, что есть группа людей, чьи анализы чаще всего показывают искаженные результаты:

• группа риска – люди, имевшие когда-нибудь контакт с больными гепатитом С,
• медработники, которым в силу своей профессии приходится иметь дело с людьми-носителями инфекций,
• пациенты с легкой формой гепатита C,
• асоциальные слои населения.

Определение вирусной нагрузки очень важно при лечении гепатита C. Проведение анализов дает медикам возможность узнать прогноз активности вируса, а также скорость его деления, оценить шанс на выздоровление пациента. Главное, ни в коем случае не лечиться самостоятельно и не прибегать без разрешения доктора к народной медицине. В борьбе с гепатитом C важно не упустить время и вовремя начать индивидуальное лечение.

(Пока оценок нет)

Влияние показателя на лечение и прогноз

В настоящее время лечение гепатита С мало зависит от параметров виремии. Ключевую роль играет разновидность HCV. Если выявлен I генотип патогена и показатели виремии слишком высоки, предпочтение отдают препаратам последнего поколения. К примеру, вместо софосбувира с даклатасвиром или другими лекарствами прямого действия, прописывают Викейру Пак.

Темпы снижения виремии характеризуются термином «вирусологический ответ» (или сокращенно ВО).

В зависимости от сроков уменьшения концентрации HCV в крови различают:

• ранний ВО – снижение виремии до неопределяемых концентраций на 12 неделе терапии;
• очень ранний ВО – отсутствие показателей на 4 неделе терапии;
• устойчивый ВО – сохранение негативного результата на протяжении полугода после окончания лечения;
• возврат вирусной инфекции – повышение виремии после кратковременного снижения;
• рецидив HCV – повторное появление вируса после успешного лечения.

Задача врача – добиться устойчивого вирусологического ответа, предикторами которого служит отсутствие виремии на 4 или 12 неделе лечения.

В целом, при нормальном состоянии печени (без цирроза) благоприятный прогноз вероятен и при высоком содержании HCV. Хотя гепатит С часто протекает без каких-либо клинических признаков, вполне реально вовремя диагностировать патологию. Для этого рекомендовано ежегодное проведение anti-HCV, а после перенесенного заболевания – качественное определение вируса методом ПЦР.

Подозрение на HCV-инфекцию является показанием для прохождения большого количества различных инвазивных и неинвазивных исследований. Вирусная нагрузка при гепатите С – один из основных показателей, определяющих прогноз течения заболевания и схему лечения.

HCV отличается гемоконтактным механизмом передачи возбудителя. Вирус передается с кровью и другими биологическими жидкостями. При этом обязательными условиями служат повреждения эпидермального покрова и/или слизистых оболочек.

Механизм заражения связан с искусственными (медицинские и немедицинские манипуляции) и естественными (вертикальный от матери к ребенку, половой и контактно-бытовой) путями передачи. Но в последние году существенно снизилась частота заражения гепатитом С при процедурах, проводимых в условиях государственных больниц и частных клиник.

HCV-инфекция характеризуется полиморфизмом клинических проявлений. У многих пациентов болезнь протекает без каких-либо симптомов, частота хронизации достигает 83%. У 35% больных через несколько лет диагностирует цирроз, а у 40% – патология постепенно переходит в первичную гепатоцеллюлярную карциному.

Ранее болезнь чаще диагностировали у относительно молодых людей 20–29 лет, в настоящее время средний возраст пациентов – 30–39 лет.

К группе особенно высокого риска инфицирования относят:

• лиц с пристрастием к наркотическим инъекционным препаратам;
• медицинских работников и косметологов, постоянно контактирующих с кровью;
• детей, родившихся от матерей, зараженных какой-либо формой гепатита С;
• членов семей инфицированных;
• пациентов стационаров, получающие множественные внутривенные манипуляции;
• лиц, занимающиеся коммерческим сексом.

С момента открытия в середине 1970-х годов HCV называли вирусным гепатитом ни-А, ни-В. В 1977 г. патология была включена в номенклатуру вирусных гепатитов. Применение новых молекулярных методик позволило в 1988 году выделить и клонировать геном HCV. В этом же году обнаружили два основных структурных белка NS3 и NS4. Впоследствии на их основе были созданы тест-системы, функционирующие по принципу радиоиммунного и иммуноферментного анализа. В 1990 году разработал метод качественной и количественной идентификации генома вируса в сыворотке крови на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Специалисты до сих пор не могут окончательно определить механизм повреждения и последующей гибели гепатоцитов. Некоторые придерживаются теории, что некроз клеток обусловлен репликацией вирусной инфекции, другие считают данный процесс следствием иммунного ответа на проникновение патогена. Вполне вероятно сочетание этих двух механизмов.

До того, как РНК вируса возможно количественно выделить методом ПЦР, патоген в своем развитии проходит несколько этапов. Это:

• прикрепление HCV к наружной мембране клетки печени;
• проникновение вируса внутрь клетки (предполагают, что это происходит из-за связи липопротеинов клеточной оболочки и субъединицы Е2 HCV);
• высвобождение РНК в цитоплазму клетки;
• трансляция РНК, формирование репликативного комплекса и прикрепление его на внутреннюю поверхность клеточной мембраны;
• синтез новых цепей РНК и патогенных белков, служащих основой для сборки вируса;
• выход вириона из клетки и поражение соседних структур.

Интенсивность этого процесса напрямую влияет на течение заболевания, вероятность сопутствующих поражений печени и их тяжесть, успех и прогноз противовирусной терапии.

Влияние показателя на лечение и прогноз

В настоящее время лечение гепатита С мало зависит от параметров виремии. Ключевую роль играет разновидность HCV. Если выявлен I генотип патогена и показатели виремии слишком высоки, предпочтение отдают препаратам последнего поколения. К примеру, вместо софосбувира с даклатасвиром или другими лекарствами прямого действия, прописывают Викейру Пак.

Темпы снижения виремии характеризуются термином «вирусологический ответ» (или сокращенно ВО).

В зависимости от сроков уменьшения концентрации HCV в крови различают:

• ранний ВО – снижение виремии до неопределяемых концентраций на 12 неделе терапии;
• очень ранний ВО – отсутствие показателей на 4 неделе терапии;
• устойчивый ВО – сохранение негативного результата на протяжении полугода после окончания лечения;
• возврат вирусной инфекции – повышение виремии после кратковременного снижения;
• рецидив HCV – повторное появление вируса после успешного лечения.

Задача врача – добиться устойчивого вирусологического ответа, предикторами которого служит отсутствие виремии на 4 или 12 неделе лечения.

В целом, при нормальном состоянии печени (без цирроза) благоприятный прогноз вероятен и при высоком содержании HCV. Хотя гепатит С часто протекает без каких-либо клинических признаков, вполне реально вовремя диагностировать патологию. Для этого рекомендовано ежегодное проведение anti-HCV, а после перенесенного заболевания – качественное определение вируса методом ПЦР.

Похожие записи:

1. Что делать если поломал ногу
2. Что делать если сломана перегородка носа
3. Что делать если ячмень долго не проходит
4. Что делать пп

Расшифровка результатов анализа

Кульминацией проведения анализа являются качественные результаты – положительный (в этом случае подробно пишут количественное значение, а также характеризуют степень зараженности), либо отрицательный.

Вирусная нагрузка при гепатите C расшифровывается в международных единицах (МЕ/мл) — количество рибонуклеиновых кислот на миллилитр крови.

Низкая нагрузка, МЕ/мл:

Рассмотрим степени нагрузки более детально:

• от 600 до 30000 МЕ/мл – низкая;
• от 30000 до 800000 МЕ/мл – средняя;
• свыше 800000 – высокая.

В большинстве случаев при подозрении на гепатит C у пациентов обнаруживается вирусная нагрузка в районе 1100000 МЕ/МЛ. Если будет назначено правильное лечение, то нагрузка постепенно начнет понижаться. При концентрации вируса свыше 400 тыс. МЕ/МЛ, принято считать, что вирус гепатита C не просто есть, но еще и стремительно размножается.

Об эффективности терапии и отрицательном результате можно судить только при абсолютном отсутствии РНК вируса гепатита C в крови пациента. Для полного спокойствия отрицательный анализ нужно получить несколько раз с большими временными интервалами. Бывает и так, что после завершения терапии и хороших анализов, происходит опять увеличение нагрузки. Это свидетельствует о большой вероятности рецидива заболевания.

Нередко в результате анализа пишут, что РНК ниже диапазона измерений. Это свидетельствует о том, что вирус определяется, но его генетического материала недостаточно для определения количества используемым методом. В этом случае на помощь приходит только способ полимеразной цепной реакции.

Женщине, получившей положительный анализ на нагрузку на гепатит C во время беременности, нужно понимать, что вирусная нагрузка очень сильно повышает вероятность заражения будущего ребенка. В таких случаях ставится ребром вопрос о сохранении беременности, так как терапия медикаментозными средствами может спровоцировать сложные генные мутации у плода.

Не стоит трактовать результаты анализов самостоятельно, для этого есть подготовленные квалифицированные специалисты.